crp仪器十大排名(crp检测仪)
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本文目录:
一、蛋白定量检测方法--双缩脲法,即Biuret法,在什么时候,由谁提出的?
金标法C-反应蛋白全血定量检测方法
发布时间:02年[$mon
原理:ycoCard CRP是一种固相的夹心法免疫试验。稀释后的样品加于卡片上6个试验孔中的1孔,标本流过反应膜,CRP分子即被固定于膜上的CRP特异性单克隆抗体所捕获,CRP将和随后加入的胶体金抗体结合物相结合,发生双抗体夹心法的反应。未结合的金标抗体,用一滴洗涤液将其从膜上清除,滤纸层将吸收过剩的液体。在标本中CRP达到病理的水平,膜上出现紫红色,颜色的强度和CRP浓度比例有关。颜色的强度可以用肉眼观察和参考比色卡相比较作出半定量的估计,或者用NycoCard READER金标定量仪作定量测定。
特异性:
----在试验中应用了抗人CRP的特异的单克隆抗体。没有发现其他的血液成份在这个NycoCard CRP试验系统中有交叉反应。
标准化:
NycoCard CRP全血法是以CRM470(IFCC/BCR/CAP参考品)所校准的。
测定范围:
CRP 10-200mg/L
精确度:
在质控实验室的试验,通常可得到的精确度是变异系数(CV)5-8%。这和整个测定的范围,也和仪器读结果有关。
干扰因素:
用肝素、枸橼酸钠或EDTA不影响试验。增高的胆红素水平、脂类或类风湿因子(RF)不影响试验的结果。当血球比积大于50%,应该加以校正。
试验盒组成,(48人份)
试验卡片:4×2PCS
每个试验卡片有6个试验孔,这些孔下方垫有渗水的包被抗CRP单克隆抗体的膜。
R1 稀释液:2×26×1.0ml
硼酸盐缓冲液(PH9.0)及洗涤剂。
R2结合物:1×3.0ml
含有用胶体金标记的抗CRP单克隆抗体的磷酸盐缓冲液。
R3洗涤剂:1×4.5ml
磷酸盐含钠缓冲液(PH7.4)及洗涤剂。
阳性质控品:1×0.5ml
加入纯化的CRP的人血清。CRP浓度在标签上。
毛细吸管:50支
25ul含有肝素钠的玻璃毛细管。
滴吸管:2支
分别用于R2结合物(黑帽)和R3洗涤液(白帽)
参考色谱图:1只
在塑料棒上带有颜色区带,指示出从10到200mg/L的5个CRP水平。为了肉眼观察的结果作解释。
塑料袋:2只
1个袋存放已使用的卡片,多余的卡片储存在另一袋中。
但试剂盒不提供需用的材料:
25ul吸管及吸管头,加标本时用。
注意点:
试剂盒有叠氮钠,有毒性,在R1、R2及R3中的浓度为0.02%,在阳性对照物中<0.1%。R1含有清洁剂,对眼及皮肤有刺激。阳性对照品的制备是用斯堪的那维亚血液中心志愿献血员的血,各个经检查乙肝S抗原,丙肝抗体及HIVI和II抗体为阴性。虽然如此,处理质控品应当像对病人标本一样谨慎小心。
稳定性及储存
在到期的日期内使用,要求试剂盒在密封的状态,在原始的容器内,储存在2-8℃。避免直接的阳光,避免在30℃以上的温度下暴露,不能冰冻。应完全按照指导使用试剂盒。
R1:存放在冰箱或室温下,在效期之前是稳定的,临用前放到室温下(15-25℃)。
R2和R3,打开的:在2-8℃是稳定的直到有效期,在15-25℃(工作完毕后置冰箱),4星期内是稳定的。
试验卡片,打开铝箔袋:在2-25℃(工作完毕放冰箱)四周是稳定的,剩下的卡片在2-8℃保持12个星期,在15-25℃为4周。各个都要关紧塑料袋口和试剂盒一起保存。
已开封的对照品:在2-8℃下4周内是稳定的,要无污染。
血标本(抗凝):在2-8℃稳定3天。
用R1稀释的血标本:在2-8℃保持8小时。
此外,用R1稀释的EDTA血在细胞完全溶解后应立即测定。
试验步骤
重要的操作注意点
·不能使用不同批号中的试剂
·在应用前把R1稀释液带入室温(15-25℃)
·R2结合物,R3洗涤液及试验卡片能在冷或平衡到室温应用。
·在试验孔的下面注上病人或质控鉴别
·吸管头或手不能接触试验膜
·在每步加液之间换吸管头
·在用后将螺帽旋紧
标本材料:
带有或不带有抗凝剂(肝素、枸橼酸盐或EDTA)的毛细管血及静脉血都能用。
质量控制:
阳性控制品应当用来证实试剂的功效及试验的正确操作。这控制品的试验按照病人标本的同样操作。测定值应当在标贴上标明的范围以内。
操作步骤:
1. 标本稀释
加25ul血标本或质控品到含有R1稀释液的试管中,盖紧试管并有力地混匀达10秒。如静置试管至少45秒。
注意:R1稀释液必须达到室温,轻轻揩去毛细管外面或吸管头外面过剩的液体。在加到卡片以前用眼观察,确保稀释的样本是澄清的。
2. 样本的使用
加入25ul稀释的血样本或稀释的质控品于预定的反应孔。使稀释的样本浸湿卡片(10-20秒)。
注意:轻轻地揩去吸管头外面过剩的液体。
3. R2结合物的使用
加1滴(或50ul)结合物(黑盖)于试验孔。让结合物浸湿卡片(20-30秒)。
注意:吸管头应当垂直,并在试验孔上方约1cm。
4. R3洗涤液的应用
加1滴洗涤液(白帽)到试验孔。使溶液浸湿卡片,在读结果前使颜色稳定(20-30秒)。在5分钟内读取结果。
注意:吸管头应被垂直握着,并在试验孔上方1cm。
结果判读
肉眼观察:
样品的CRP浓度是将试验的反应和参考图谱相比较之后被估计的。色谱的区带符合于下面的血样本的血清部分中的CRP浓度:10mg/L,25mg/L,50mg/L,100mg/L,200mg/L试验结果被推荐以下方式作报告:
试验反应的颜色 CRP浓度
比10mg/L区带的颜色浅 <10mg/L
和区带等同 和区带一致
在2个区带之间 估计值在2区带之间
比200mg/L区带的颜色深 >200mg/L
仪器测读
NycoCard READER作为定量测定其结果。按照仪器手册读结果。
血球比积的影响:
血球比积超过50%的样本,其试验结果应该按表随各个系数而增加。
血球比积% 50 55 60 65 70 75 80
系数 1.2 1.3 1.5 1.7 2.0 2.4 3.0
血容比积参考范围:女子35-44% 男子39-48%
正常CRP水平(≤10mg/L)
血清CRP参考范围通常报告在10mg/L以下。NycoCard CRP结果等同或小于10mg/L被认为是正常的。
增高的CRP水平(>10mg/L)
CRP水平大于10-15mg/L通常被认为是病理性的。病毒及轻度细菌感染,CRP浓度适度增加(达50mg/L)。当严重的细菌感染就显著增加(大于60mg/L)。
注意事项
·在加样本到试验孔时开成气泡,应重新试验
·血细胞溶解不完全。R1洗涤液需放在室温(15-25℃),有力地混匀稀释的样本(约10
秒)。将试管放置至少45秒。
·由于离白血球水平(>60×109/L)、纤维物质及血细胞不完全溶解,而减少样本流过滤
膜。如果在15-25℃溶解时间之后稀释样本仍然混浊,离心,用上清液加到卡片上。
·不准确的吸管要进行校正吸管。
·在R2结合物完全浸湿卡片之前就加R3洗涤液,这将导致假阳性结果。
·血细胞不完全溶解或渗滤受阻也可能导致假阳性结果。
二、起敏CRP高是什么意是
C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)是由Tillet和Francis于1930年在一些急性病患者的血清中发现,是环状五球体蛋白,属于Oligomeric钙结合蛋白,相对分子质量约120000,由5个相同的单体以非共价键构成,是炎性淋巴因子白介素-6、白介素-1,肿瘤坏死因子刺激肝脏上皮细胞合成的。因为它能和肺炎链球菌的荚膜C多糖起沉淀反应而得名。超敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein, hs-CRP)是使用高敏感的检测方法,即检测方法具有检测到≤0.3mg/L的CRP的能力.图1:CRP的分子结构『CRP在人体内是怎样反应的呢?』它是非特异性免疫机制的一部分,在钙离子存在下可以结合膜上的磷脂酸胆碱,也可结合染色质激活补体的经典途径,增强白细胞的吞噬作用,刺激淋巴细胞或单核/巨噬细胞活化,起调理作用。在微生物入侵,组织损伤、免疫反应、炎症过程时升高,出现快,半衰期短,随炎症过程发生变化,CRP的水平与炎症的出现及其严重程度具有相关性。但是CRP不能通过胎盘,故正常新生儿血清中含量极微。『CRP和哪些疾病有关呢?』1.感染的诊断和鉴别: 由于CRP在感染发生后6~8h即开始升高,24~48h达到高峰,高峰值可达正常的数百倍,在感染消除后其含量急骤下降,一周内可恢复正常。而CRP在病毒感染时无显著升高,这为疾病早期感染类型的鉴别提供了极其重要的依据。2.确定抗生素的疗效: CRP在确定抗生素的疗效方面也发挥了作用。挪威的一个研究小组对感染A型溶血性链球菌的11例咽炎确诊病例进行了抗生素治 疗,并同时记录其治疗前、治疗后1、2、3d的CRP水平、体温和咽痛减轻程度等指标。结果显示,与治疗前相比,治疗后的1、2、3d CRP分别下降34.1%、60.1%和75.3%,并且,CRP降低的程度与症状的减轻和治疗后的天数明显相关(P<0.01)。3.与心血管疾病的关系: 低水平的CRP(0.1~10mg/L)与心血管疾病的发生有着密切的关系,是心血管炎症病变的生物标志物。这个水平的C反应蛋白又被称为较高的超敏C反应蛋白(hs-CRP)。个体的 CRP基础水平和未来心血管疾病的发病关系密切。CRP可能是比低密度脂蛋白胆固醇更有效的独立的心血管疾病预测指标,可以增加血脂检查、代谢综合症和Framingham危险评分的预后价值。C反应蛋白作用于冠状动脉粥样硬化时的反应变化4.监测女性人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency, HIV )感染者病死率方面:有报道称CRP是独立于年龄、体重指数、血浆白蛋白、CD4淋巴细胞和HIV-1 RNA之外的预测因子,病死的危险性与CRP升高的程度相关,根据CRP升高程度的不同危险性可增加3.4 ~13.6倍。5.病情的监测: CRP炎性疾病发作6h含量即迅速升高,持续时间与病程相当,一旦疾病恢复,CRP含量迅速下降,对临床有一个先驱的预报作用。若CRP持续升高或再度回升,提示必须予以重视。6.新生儿疾病的早期诊断和监测: 有研究显示hs-CRP在早期新生儿,尤其有异常分娩史者进行常规检测,并观察动态变化,对新生儿疾病的早期诊断、判定疗效有重要意义。早产儿24h、72h的hsCRP均值有显著性差异,足月儿也有类似变化,可能提示新生儿72h的免疫功能与24h比较可能有了显著变化,尤其在产生IL-6等因子方面。早产儿与足月儿的CRP升高与感染明显相关。故认为新生儿出生3d内测CRP仍有非常重要的意义。7.其他疾病: 血液系统:恶性淋巴瘤(何杰金氏病得多)、白血病等;胶原病、过敏性及自身免疫性疾病的活动期(风湿热、 SLE 、类风湿等)、传染病、败血病及其他恶性肿瘤。『CRP在这些疾病中的数值变化是怎样的』1.感染性疾病: 儿童和成年人90%<3mg/L,99%<10mg/L,10~99 mg/L提示局灶性或浅表性感染,≥100mg/L提示败血症或侵袭性感染等严重感染。敏感性达 100%。2.新生儿细菌性感染:一 般新生儿血清CRP水平<2mg/L,大于此值即与细菌感染的严重程度有关。3.用于心血管疾病危险性评估时: 一般认为,hs-CRP<1.0mg/L为低危险性;1.0~3.0mg/L为中度危险性;P>3 mg/L为高度危险性。部分研究报道CRP>3.0mg/ L作为预测心脏意外发生指标的敏感性为90%,特异性为82%。『这些疾病中检测项目除CRP还有其他“伙伴”吗?』1.感染性疾病: 检测CRP的同时可检测NAP、WBC及DC等指标,并且不同性质的疾病还需检测细菌学、病毒学等指标。2.心血管疾病: hs-CRP和血脂一样,都是心血管疾病的危险因素,hs-CRP水平与一些传统用于评估心血管疾病危险性的指标(如年龄、吸烟、胆固醇水平、血压、糖尿病等)没有直接关系。3.其他疾病: 这些疾病除检测CRP之外,还需根据病情检测其他免疫指标等项目。『感染性疾病已经检测其他项目,为什么还要检测CRP呢?』1.血液中WBC 的基础值个体差异较大, 正常值范围较宽,根据异常结果的判定标准, 只有在<4.0×109/L或>10.0×109/L时才被认为异常, 而且升高不显著, 只呈1倍至几倍增长。并且WBC总数易受运动、精神等多种因素影响, 所以WBC计数用于细菌性感染的诊断敏感性不够, 有一定的局限性。2.白细胞分类计数是细菌性感染较好的实验诊断指标, 能为临床诊断提供较为可靠的依据。但由于目前白细胞分析仪的广泛使用, 仪器分类的结果不一定全部可信, 需同时做血涂片瑞氏染色分类, 但瑞氏染色分类耗时较长, 限制了其在临床上的广泛应用。3.NAP 受许多体内因素调节, 如激素、糖代谢、锌离子、基因等;当机体处于应激状态如细菌感染、发热等时, 机体代谢增加,NAP活力均可增高。虽在诊断细菌性疾病中是一项较好的实验室指标,但操作相对繁琐。检验时间长, 不能为临床提供快速的实验结果。4.有研究显示:应用ROC曲线评价血清CRP、白细胞总数和中性粒细胞对急性阑尾炎的诊断效率由高到低排序为CRP>白细胞总数>中性粒细胞,针对老年患者排序为CRP>中性粒细胞>白细胞总数以上显示,检测CRP具有非常重要的临床应意义。
三、超敏crp是什么
超敏crp是非特异性免疫机制的一部分,在钙离子存在下可以结合膜上的磷脂酸胆碱,也可结合染色质激活补体的经典途径,增强白细胞的吞噬作用,刺激淋巴细胞或单核/巨噬细胞活化,起调理作用。
在微生物入侵,组织损伤、免疫反应、炎症过程时升高,出现快,半衰期短,随炎症过程发生变化,CRP的水平与炎症的出现及其严重程度具有相关性。但是CRP不能通过胎盘,故正常新生儿血清中含量极微。
扩展资料:
一:超敏crp的作用:
hs-CRP主要用于诊断和预测心血管事件的发生、发展;新生儿和婴幼儿的细菌/病毒感染、各种炎症过程的筛查、监测、评估与药物疗效判断等。
hs-CRP水平浓度测定可作为判断急性冠脉综合征发生、预后的监测指标。另外,因婴幼儿基础值较成人低,故新生儿与婴幼儿炎症水平要用hs-CRP来反映。
超敏crp在冠心病、中风、周围血管栓塞等疾病诊断和预测中发挥越来越重要的作用,甚至被认为是心血管病危险评估的“金标准”。
二:超敏crp的临床应用
1、超敏C反应蛋白与颅脑损伤
颅脑损伤后血清超敏C反应蛋白均有不同程度升高,且伤情越重,升高越明显。这说明超敏C反应蛋白不仅是一种疾病标记物,同时也参与创伤性疾病的致病过程,且创伤越严重,肝细胞在IL-6等细胞因子诱导下合成超敏C反应蛋白的速度越快,并释放入血液中。伤情越重,超敏C反应蛋白的下降速度越慢。可见,颅脑损伤后超敏C反应蛋白升高幅度和持续时间是反映颅脑损伤严重程度和观察疗效的理想指标,对判断伤情轻重、预测预后有重要意义
2、超敏C反应蛋白与动脉粥样硬化
近年来研究表明,超敏C反应蛋白位于动脉粥样硬化斑块内,具有调节单核细胞聚集作用,超敏C反应蛋白是补体激活剂,与膜攻击复合物共同存在于早期动脉粥样硬化病变内,可刺激组织因子生成,并且聚集的超敏C反应蛋白可激活补体。组织因子主要启动血凝过程。由于慢性微量炎性因子激活补体而引发脂质沉积于血管壁,通过浸润、聚集,造成血管损伤而导致动脉粥样硬化。
3、超敏C反应蛋白与冠心病
美国内科健康研究(PHS)显示:超敏C反应蛋白在最高组别的患者将来疾病发作的危险性是正常人的2倍,将来发生心肌梗死(MI)的危险性是正常人的3倍,将来发生外周动脉疾病的危险性是正常人的4倍。欧洲MONICA 的Augsburg研究显示:最高组别的人群高的超敏C反应蛋白人群将来发生冠状动脉疾病的危险性是正常人的2.6倍。
冠心病患者的血浆超敏C反应蛋白水平与冠状动脉病变有着密切的联系,反映了心肌受损的程度。因此,这项指标有助于对冠心病发生、发展和预后做出准确的判断,具有重要的临床意义。血清超敏C反应蛋白水平与冠状动脉狭窄积分无直接相关性。冠心病患者血清超敏C反应蛋白水平与动脉粥样斑块的稳定性有关,而与冠状动脉狭窄程度无关。
① CRPH <1.0mmol/L,心血管疾病评估为低危险性;
② CRPH 1.0—3.0mmol/L,心血管疾病评估为中度危险性,建议予抗炎治疗;
③ CRPH >3.0mmol/L,心血管疾病评估为高度危险。建议抗炎抗栓联合治疗。
4、超敏C反应蛋白与脑血管病
炎症反应促使动脉粥样硬化的发生和发展,血清超敏C反应蛋白是反映动脉粥样硬化患者临床病情的一个敏感指标。超敏C反应蛋白值与脑血管疾病危险因素(年龄、体重指数、腹围、收缩压、舒张压、空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇)均呈显著相关; 超敏C反应蛋白值与收缩压、空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇呈显著正相关。超敏C反应蛋白与急性脑卒中患病显著相关;血压、空腹血糖与血脂是影响超敏C反应蛋白的主要独立因素。早期监测超敏C反应蛋白对颈动脉粥样硬化引起的缺血性脑卒中有警示意义。
三:超敏crp偏高的原因
儿科 CRP 升高最常见的原因是感染,通常认为 CRP 升高提示存在细菌感染,而且革兰阴性细菌感染高于革兰阳性细菌感染;但在病毒、支原体、真菌感染中也可出现 CRP 升高,但后三者升高程度常常不如细菌感染。
当 hs-CRP > 20 mg/L,白细胞>10×109/L 时,一般考虑细菌感染可能性大;
当病程超过 24 小时,hs-CRP 仍<5 mg/L, 白细胞<10×109/L 时,病毒感染可能性大;
而处于以上两种情况之间的患儿考虑细菌、支原体、真菌感染均有可能。
但需注意以下 3 点:
(1)在手足口病、疱疹性咽峡炎常常出现 CRP 升高,CRP 升高能提示重症病例,但尚不能区别是否合并细菌感染,需通过联合检测 PCT(特异度 98%、敏感度 94%)帮助鉴别。
(2)状病毒肠炎患儿存在发热、呕吐、脱水表现时 CRP 也可明显升高,但多数患儿急性期过后不使用抗菌药物也可迅速恢复正常。
(3)CRP 显著升高,抗感染治疗效果欠佳时需警惕自身免疫性疾病,如川崎病、炎性肠病、幼年类风湿性关节炎、SLE 等疾病,通常提示疾病活动,但因其特异性较差,仅能在诊断方向提供可疑线索。
四、BF一6900cRp与RT一pcR是否为同一仪器?
对的,这两个其实是同一种仪器,只不过是不同的表现名而已。
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