2、色谱法的分类
色谱分离法的类型及基本原理
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本文目录:
一、液相色谱法的原理和分类
液相色谱法的分离机理是基于混合物中各组分对两相亲和力的差别。根据固定相的不同,液相色谱分为液固色谱、液液色谱和键合相色谱。应用最广的是以硅胶为填料的液固色谱和以微硅胶为基质的键合相色谱。根据固定相的形式,液相色谱法可以分为柱色谱法、纸色谱法及薄层色谱法。按吸附力可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶渗透色谱。近年来,在液相柱色谱系统中加上高压液流系统,使流动相在高压下快速流动,以提高分离效果,因此出现了高效(又称高压)液相色谱法。 采用柱色谱技术的一种高效液相色谱法,样品展开方式采用洗脱法。根据不同的分离方式,离子色谱可以分为高效离子色谱 、离子排斥色谱和流动相离子色谱3类。高效离子色谱法使用低容量的离子交换树脂,分离机理主要是离子交换。离子排斥色谱法用高容量的树脂,分离机理主要是利用离子排斥原理。流动相离子色谱用不含离子交换基团的多孔树脂,分离机理主要是基于吸附和离子对的形成。
离子色谱仪由淋洗液贮存器 、泵 、进样阀 、分离柱 、抑制柱、电导检导器和数据处理单元等组成。离子色谱仪最重要的部件是分离柱,装有离子交换树脂。抑制柱是抑制型离子色谱仪的关键部件,其作用是将淋洗液转变成低电导部分,以降低来自淋洗液的背景电导,同时将样品离子转变成其相应的酸或碱,以增加其电导。分离阴离子,抑制柱填充强酸性阳离子交换树脂;分离阳离子,抑制柱填充强碱性阴离子交换树脂。检测器分通用型检测器与专用型检测器。前者如电导检测器,对检测池中所有离子都有响应;后者如紫外-可见分光光度计,对离子具有选择性响应。 离子对色谱法是将一种(或数种)与样品离子电荷(A+)相反的离子(B-,称为对离子或反离子,Counterion)加入到色谱系统的流动相(或固定相)中,使其与样品离子结合生成弱极性的离子对(呈中性缔合物)。此离子对不易在水中离解而迅速进入有机相中,从而控制溶质离子的保留行为。
二、色谱法的分类
以下是色谱法的分类及原理:
按两相状态分类。以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法(GC)。根据固定相是固体吸附剂还是固定液(附着在悟性载体上的薄层有机化合物液体),气相色谱法又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC)。以液体为流动相的色谱法称为液相色谱法(LC)。同理,液相色谱法也可再分为液固色谱法(LSC)和液液色谱法(LLC)。
按分离机理分类。利用组分在吸附剂(固定相)上的吸附能力强弱不同而进行分离的方法,称为吸附色谱法。利用组分在固定液(固定相)中溶解度不同而进行分离的方法称为分配色谱法。利用组分在离子交换剂(固定相)上的亲和力大小不同而进行分离的方法,称为离子交换色谱法。
利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而进行分离的方法,称为凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法。最近,又有一种新分离技术,是利用不同组分与固定相(固定化分子)的高专属性亲和力来进行分离,称为亲和色谱法,常用于蛋白质的分离。
按固定相使用的外形分类。固定相装于柱内的色谱法,称为柱色谱法,板状的色谱法,称为平板色谱,它又可分为薄层色谱法和纸色谱法
三、色谱分离技术的色谱种类
色谱有多种,按固定相类型和分离原理可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、亲和色谱、大孔吸附树脂、凝胶色谱、聚焦色谱等。最常用的是吸附色谱分离技术。
吸附色谱法是指混合物随流动相通过吸附剂(固定相)时,由于吸附剂对不同物质具有不同的吸附力而使混合物中各组分分离的方法。此法特别适用于脂溶性成分的分离。被分离的物质与吸附剂、洗脱剂共同构成吸附层析的三要素,彼此紧密相连。
四、简述色谱法的四种原理机制
色谱法的原理是待分离物质分子在固定相和流动相之间分配平衡的过程,不同的物质在两相之间的分配会不同,这使其随流动相运动速度各不相同,随着流动相的运动,混合物中的不同组分在固定相上相互分离。根据物质的分离机制,又可以分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱等类别。
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