色谱法根据分离原理可分为
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本文目录:
一、色谱分离技术的色谱种类
色谱有多种,按固定相类型和分离原理可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、亲和色谱、大孔吸附树脂、凝胶色谱、聚焦色谱等。最常用的是吸附色谱分离技术。
吸附色谱法是指混合物随流动相通过吸附剂(固定相)时,由于吸附剂对不同物质具有不同的吸附力而使混合物中各组分分离的方法。此法特别适用于脂溶性成分的分离。被分离的物质与吸附剂、洗脱剂共同构成吸附层析的三要素,彼此紧密相连。
二、色谱法可以按照什么来分类?
按色谱法分离所依据的物理或物理化学性质的不同,又可将其分为5类,分别是:
1、吸附色谱法:利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差别而使之分离的色谱法称为吸附色谱法。适于分离不同种类的化合物(例如,分离醇类与芳香烃)。
2、分配色谱法:利用固定液对不同组分分配性能的差别而使之分离的色谱法称为分配色谱法。
3、离子交换色谱法:利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法,利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。
离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离,而且广泛地应用于有机和生物物质,如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离。
4、尺寸排阻色谱法:是按分子大小顺序进行分离的一种色谱方法,体积大的分子不能渗透到凝胶孔穴中去而被排阻,较早的淋洗出来;中等体积的分子部分渗透;
小分子可完全渗透入内,最后洗出色谱柱。这样,样品分子基本按其分子大小先后排阻,从柱中流出。被广泛应用于大分子分级,即用来分析大分子物质相对分子质量的分布。
5、亲和色谱法:相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。例如利用酶与基质(或抑制剂)、抗原与抗体,激素与受体、外源凝集素与多糖类及核酸的碱基对等之间的专一的相互作用;
使相互作用物质之一方与不溶性担体形成共价结合化合物,用来作为层析用固定相,将另一方从复杂的混合物中选择可逆地截获,达到纯化的目的。可用于分离活体高分子物质、过滤性病毒及细胞。或用于对特异的相互作用进行研究。
其应用:
色谱法的应用可以根据目的分为制备性色谱和分析性色谱两大类。
制备性色谱的目的是分离混合物,获得一定数量的纯净组分,这包括对有机合成产物的纯化、天然产物的分离纯化以及去离子水的制备等。
相对于色谱法出现之前的纯化分离技术如重结晶,色谱法能够在一步操作之内完成对混合物的分离,但是色谱法分离纯化的产量有限,只适合于实验室应用。
分析性色谱的目的是定量或者定性测定混合物中各组分的性质和含量。定性的分析性色谱有薄层色谱、纸色谱等,定量的分析性色谱有气相色谱、高效液相色谱等。色谱法应用于分析领域使得分离和测定的过程合二为一,降低了混合物分析的难度缩短了分析的周期,是比较主流的分析方法。
在中华人民共和国药典中,共有超过约600种化学合成药和超过约400种中药的质量控制应用了高效液相色谱的方法。
三、简述色谱法的四种原理机制
色谱法的原理是待分离物质分子在固定相和流动相之间分配平衡的过程,不同的物质在两相之间的分配会不同,这使其随流动相运动速度各不相同,随着流动相的运动,混合物中的不同组分在固定相上相互分离。根据物质的分离机制,又可以分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱等类别。
四、色谱法分离是根据什么原理进行的
色谱分离法;chromatographic
separation
在工业上应用色谱分析原理分离性质近似组分的方法。使溶液分批通过垂直的填充吸附剂固定床,将各种组分分离精制。色谱柱内的填充吸附剂是多孔的惰性固体,用非挥发性的惰性液体涂渍。被分离溶液的溶质与惰性液体有大小不同的溶解度。如果被吸附的物质是气体,发生“吸收”现象。如果被吸附的物质是液体,发生“萃取”现象。分离系数取数聚决于分配系数的大小。常用的操作法有:(1)迎头分离法,当溶液连续通入吸附固定床时,溶液中诸组分因吸附能力大小不同,可顺序地由固定床另一端排出;(2)冲洗分离法,在送入溶液的同时,通入不被吸附的载体,可顺序地被吸附和解吸,然后以一定的间隔隔离开;(3)顶替分离法,在载气中加入吸附能力最强的组分,使依次顶替被吸附的诸组分。色谱分离除已在分析技术中广泛应用外,也已在化工、冶金和环保等领域中加以利用。
色谱的分离原理都是利用待测物质在流动相和固定相两相间的分配系数的不同而实现分离.
对于气液色谱来说,分离原理是利用不同物质在流动相以及固定液中的分配系数(溶解度)不同而实现分离;当流动相流动时,流动相是溶解性相近的惰性气体,而固定相的溶解性随固定液的不同而不同,所以分配系数主要决定于固定液的性质。
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